实验动物常用处死方法

一、实验动物处死的定义

Euthanasia这个词源于希腊语，en意思是好的，thanasia意思是死亡。这个词常用于描述用一种减轻或者消除疼痛和痛苦的方法结束单个动物的生命。实验动物处死指的以科学人道的理念和方式，使动物生理和心理痛苦最小化而采取的动物意识迅速丧失的处死过程。

二、执行动物处死的实施条件

仁慈终点（human endpoints）：指动物实验过程中，在得知实验结果时，及时选择动物表现疼痛和痛苦的较早阶段为实验的终点。

在达到以下条件时，可实施处死：①得到实验结果或动物实验结束；②经实验动物医师结合动物的体重、食欲、感染、肿瘤、濒死症状等，评估判定，动物痛苦程度达到或超过预设的仁慈终点；③其他原因不适合继续饲养。

三、选择处死方法考虑因素

①可使动物无疼痛、恐惧、焦虑和不安地失去知觉和意识，直至死亡；②可缩短动物从失去知觉和意识到死亡的时间；③药物及方法经过验证，科学可靠；④操作过程不影响操作人员情绪、健康和安全；⑤处死过程不可逆转；⑥适合不同种类、年龄与健康状况的动物；⑦适合不同实验需求和目的；⑧所用设备方便易得，便于维护；⑨不影响环境卫生；⑩所有处死方法实施后确认动物死亡，必要时要配合使用第二种处死方法予以确认。

四、常用处死方法

摘自“2020版美国兽医协会动物处死指南解析”。

五、常用处死方法

1、吸入性药物

（1） 常见吸入性药物包括 CO2、氮气（N2）、氟烷、甲氧氟烷、异氟烷、安氟醚等。

（2） CO2是啮齿类动物最常用的吸入性药物,适用于小鼠、大鼠、豚鼠和地鼠等啮齿类动物。吸入40% CO2 时很快达到麻醉效果，而长时间持续吸入可导致动物死亡。处死箱内动物不宜过多。可使用透视性好的箱子，以便确认动物死亡。

（3） 实施吸入性药物处死宜在通风良好场所实施。

2、注射药物

（1） 常用注射药物包括巴比妥类药物等。

（2） 常用注射方式包括静脉注射、腹腔注射、心脏注射等,优先选择静脉注射。

（3） 腹腔注射需使用较高剂量的药物，会使动物死亡时间延长及死前挣扎。心脏注射只适用于呈现垂死、休克或深度麻醉中的动物。

3、物理方式

（1） 可采用颈椎脱臼、断颈、电击、头部击碎、放血等物理方式处死动物。

（2） 物理方式可用于那些解剖性状适合使用该方法，或者当其他处死方法可能影响实验结果的动物。

（3） 所有操作人员建议接受完整的技术训练，并以尸体多次练习后方可正式实施。

（4） 颈椎脱臼法可用于体重低于200g的啮齿类动物、禽类及兔。除非有特殊需求，实施颈椎脱臼前可给予动物镇定剂，以减少动物的应激。

（5） 因实验需求无法使用化学药物或CO2时，可使用断颈法。因实验所需采集动物的全身血液或放血,需先麻醉待动物失去知觉后实施。

六、总结

对于绝大多数的脊椎动物来说，都可以将静脉注射巴比妥类药物作为处死的首选方法。若无法获取巴比妥类药物，或在动物难以保定的情况下，可选取条件性接受处死方法。值得注意的是，一种方法是否定义为条件性接受的处死方法，与操作人员熟练程度、动物的生物学特性及操作环境等多方面因素有关，并不局限于方法本身。例如，采用吸入性麻醉气体处死动物时，实验人员必须要在确定动物失去反射后，辅以物理性方法确保动物死亡。因此，采用第二种方法确保动物死亡是使用吸入性麻醉法处死动物的前提条件。又如，对适用于颈椎脱臼法的啮齿类动物，如果操作人员可以保证瞬问将动物颈椎脱臼，则该方法是可被接受的。因此，采用颈椎脱臼法的前提条件是实验技术人员的操作足够熟练。再如，吸入性气体若要用于兔的处死，其前提条件是兔已经处于麻醉或镇静状态，以避免兔出现特有的屏气反应。由以上案例可以发现，所谓的条件性接受处死方法，其所要求的前提条件是不同的。当前提条件都被满足时，条件性接受等同于首选处死方法。具体要选择何种处死方法，应由执行或监督处死操作的兽医根据操作人员的技术能力、动物种类、顺应程度、麻醉状态、实验终点要求和死亡确认步骤，选择适合的处死方法